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    貓血支原體探針法熒光PCR檢測試劑盒

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    更新日期:
    2024-08-17
    點擊次數(shù):
    764
    產(chǎn)品特點:
    貓血支原體探針法熒光PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
      50次貓血支原體探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

    樣品RNA的抽提:
    產(chǎn)品僅用于科研取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
    ②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
    2 RNA質(zhì)量檢測
    1)紫外吸收法測定
    先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
    ① 濃度測定
    A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。

     產(chǎn)品名稱

    貓血支原體探針法熒光PCR檢測試劑盒

     英文名稱

     Mycoplasma haemofelis

     貨號

     YSP96975

    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
          dNTP mixl                 4μl
          引物1(10pM)               2μl
          引物2(10PM)              2μ
          Taq酶(2U/μl)            1μl
          DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
          加ddH2O至               50 μl
       視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
    3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。好設(shè)立一個的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
    3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

    熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
    本實用新型技術(shù)公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過轉(zhuǎn)動件轉(zhuǎn)動連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個部分,并將兩個部分通過側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
    客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
    ARPM1 英文名稱: 肌動蛋白相關(guān)蛋白M1抗體 0.2ml

    Anti-CCL1/I-309/TCA3/FITC 熒光素標記嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

    OT/BGP ELISA Kit 大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

    Anti-ATF4/FITC 熒光素標記活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

    Rhesus antibody Rh factor XIII 凝血因子13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子) 規(guī)格 0.2ml

    BGP(Osteocalcin/Bone Gla-protein)ELISA Kit 兔骨鈣素 ELISA試劑盒 96T

    Mycobacterium tuberculosis Ag85B 英文名稱: 結(jié)核分枝桿菌抗體 0.2ml

    C12ORF42 英文名稱: 12號染色體開放閱讀框42抗體 0.2ml

    Anti-IRS P53 胰島素受體底物p53蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

    HCG(Human Chorionic Gonadotrophin) ELISA Kit 人絨毛膜促性腺激素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

    Anti-LYVE-1 淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

    Rhesus antibody Rh KIF20A/MKLP2 有絲分裂驅(qū)動蛋白樣2抗體 規(guī)格 0.2ml

    F-TESTO ELISA Kit 大鼠游離睪酮 96T

    PDLIM3 英文名稱: 輔肌動蛋白相關(guān)LIM蛋白抗體 0.1ml文名稱: Rat islet cell antibody,ICA ELISA Kit 
    大鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: Rat Amylin ELISA Kit
    ELISA Kit進口/原裝
    小鼠淋巴細胞因子ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse lymphocyte factor ELISA Kit*
    小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit進口/原裝
    人內(nèi)皮細胞分離液1.060Cell Separation Solution-20℃保存200 mL
    人免疫缺陷病毒PCR檢測試劑盒低溫運輸,-20℃保存50T
    人淋巴細胞分離液1.077(FICOLL 配置) Cell Separation Solution-20℃保存200 mL
    人淋巴細胞分離液1.077Cell Separation Solution-20℃保存200 mL
    人粒細胞分離液1.113Cell Separation Solution-20℃保存200 mL
    人類單鏈選擇性單功能尿嘧啶-DNA糖基化酶hSMUG1-20℃保存500U
    人巨細胞病毒PCR檢測試劑盒低溫運輸,-20℃保存50T
    人甲基化/非甲基化DNA標準品Human ?30成員3 多克隆抗體ZNT3 Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
    貓血支原體探針法熒光PCR檢測試劑盒中心體蛋白70/p10結(jié)合蛋白抗體SRC3/KAT13B/AIB1/FITC  熒光素標記類固醇受體輔助活化因子-3抗體IgG100 ul

    中心體蛋白72抗體Phospho-SRC-3 (Thr24)/FITC  熒光素標記酸化類固醇受體輔助活化因子-3抗體IgG100 ul

    中心體蛋白95抗體Phospho-SRF (Ser103) /FITC  熒光素標記酸化生長激素釋放因子抗體(血清應答因子) IgG100 ul

    中心體蛋白89抗體SRG2 /FITC  熒光素標記突觸結(jié)合蛋白相關(guān)基因2抗體IgG20 ul

    CERD4蛋白抗體Synaptotagmin-4/FITC  熒光素標記突觸結(jié)合蛋白4抗體IgG100 ul

    CES1P1蛋白抗體SRG5/SPATA12/FITC  熒光素標記發(fā)生相關(guān)基因5抗體IgG20 ul

    羧酸酯酶2抗體SRG11/Spata17/FITC  熒光素標記凋亡基因抗體IgG100 ul

    羧酸酯酶3抗體52KDa Ro/SSA /FITC  熒光素標記核糖核蛋白抗原52kD-Ro/SSA抗體IgG300 ul

    羧酸酯酶4A抗體SSB/La /FITC  熒光素標記抗干燥癥SSB/La抗體IgG100 ul

     

    產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 貓血支原體 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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